来自Bacillus circulans WZ-12的二氯甲烷脱卤酶基因dcmR的克隆和表达

【摘要】：通过PCR方法从Bacillus circulans WZ-12中分离到二氯甲烷脱卤酶基因dcmR,构建具T7强启动子的pET28b(+)-dcmR质粒,电击转化Escherichia.coli BL21(DE3),构建了二氯甲烷生物降解基因工程菌BL21[pET28b(+)-dcmR].重组菌经IPTG诱导后,表达蛋白占总蛋白的32%.表达蛋白的酶活最高可达25.78 U/mL,酶的比活(以蛋白计)为88.86 U/mg.重组菌周质中酶活2.92 U/mL,胞内酶活22.86 U/mL.重组菌产生的酶的活力和比活较原降解菌株高1~2倍.对工程菌的生长特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培养基中的生长特性与原始菌株没有差别,生长至对数期A600 nm值都可达2.4左右.重组菌株dcmR-1在25 h的降解率达90%以上,降解效率比原降解菌株有明显提高.该基因工程菌的构建对二氯甲烷生物降解机制研究以及复合污染环境的生物修复和工程应用具有实际意义. 【作者单位】： 浙江工业大学生物与环境工程学院;浙江大学宁波理工学院;
【关键词】： 二氯甲烷 脱卤酶基因dcmR 基因克隆与表达 生物降解
【基金】：国家自然科学基金项目(20276070) 国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA06A310) 浙江省环境工程重中之重学科开放基金项目(20080208)
【分类号】：Q78
【正文快照】： 二氯甲烷(CH2Cl2)是一类应用非常广泛的化学试剂,主要在金属材料去油污、纺织、印染、油漆行业和制药工业等领域作溶剂使用.当前,二氯甲烷被认为是大气污染中毒性较大的卤代烃类物质,严重危及人类健康.有报道称环境中CH2Cl2超过10 mg/L浓度即可对人体生理过程造成不同程度的

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